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万兴科技(300624.SZ)集团成员

医学实验流程

立即使用

Caco-2 细胞

37 ℃条件下孵育,

待细胞密度达到 50 % ~ 70 %

以 1 × 10^5 /μL 细胞密度将 Caco-2 细胞接种到 transwell 小室中

培养约3周,

获得融合的单层细胞;

经胰蛋白酶处理

选择已被证实模型建立成功的肠上皮 Caco-2 单层细胞

组脂多糖(LPS)

LPS + SCFA 组

短链脂肪酸(SCFA)组

对照组

EMEM:

10% 胎牛血清

1% 非必需氨基酸

测量:

PH 在 7.2-7.4

电阻(TEER)>350Ω·cm2, 450Ω·cm2左右为宜

LPS(100 μg/mL)或 SCFA(2.0mmol/l)处理肠上皮 Caco-2 单层细胞 12、24、48 h

Western blot 检测 TJ 蛋白(ZO-1 和 Occludin)表达

利用细胞电位仪测跨上皮细胞电阻(TEER)

利用免疫荧光方法观察 TJ 蛋白在细胞膜的分布

实验分析

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发布时间: 2021-03-31